DNA提取原理(磁珠法)
發(fā)表時間:2023-09-19DNA(脫氧核糖核苷酸)在生物學和遺傳學中具有極其重要的地位。DNA是存儲生物體遺傳信息的載體,它決定了生物遺傳特征和功能的遺傳代碼,DNA在醫(yī)學、生物工程和基因編輯、科學研究等都有極為重要的作用。總的來說,DNA是生命科學的核心分子,對于了解生命的本質(zhì),是不可繞過的重要一節(jié)。它被認為是生命的基礎,對人和自然界都有深遠的影響。因此,DNA提取是生物技術中的重要一環(huán)。以下便是DNA提取原理(磁珠法)的具體內(nèi)容。
DNA提取原理(磁珠法)的最主要因素是磁性珠子(磁珠)上表面的基團與DNA磷酸基團、鹽溶液中金屬離子所形成的相互作用。
磁珠的表面通常被修飾或涂覆上一層特殊的分子,例如硅膠或其他具有親和性的分子或基團(DNA/RNA提取多為羧基)。這些分子能夠與DNA相互吸引和結(jié)合,因為DNA分子上帶有帶電的磷酸基團,而修飾的磁珠表面帶有相應的親和性分子。
DNA提取(磁珠法)中多用聚乙二醇(PEG)。低濃度的PEG作為聚合劑,還能保持溶液的沾度,使磁珠可以保持懸浮狀態(tài),不易聚沉,也不易造成非特異性吸附。
DNA提取原理(磁珠法)最關鍵的因素即為在PEG和NaCl的促進作用下,因DNA構陷變化,從而使得磷酸骨架上的帶負電的磷酸基團與磁珠表面的羧基結(jié)合,磷酸基團(負電荷)借助著鹽溶液中的的Na+離子與磁珠上羧基(負電荷)所形成的“陰離子-陽離子-陰離子”鹽橋,使DNA被特異性吸附到磁珠表面。
當緩沖液被棄除后,加入水性分子,DNA分子會被快速水化,鹽橋中三者間的離子相互作用被解除,使得被吸附到磁珠上的DNA分子被純化出來。
應用外部磁場可以方便地控制磁珠的位置。通過將樣本混合磁珠后,應用磁場使磁珠集中在一個區(qū)域,而未結(jié)合的雜質(zhì)則可以輕松去除,從而實現(xiàn)DNA的分離和洗脫。
總之,DNA提取原理(磁珠法)就是利用磁性珠子表面的特殊化學性質(zhì),與DNA之間的親和性相互作用,以及外部磁場的幫助,能夠高效地提取和分離DNA,使得DNA提?。ù胖榉ǎ?/span>成為一種廣泛應用于分子生物學實驗和臨床診斷的有效技術。
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